技術原理

3D數字PCR是一種基于單分子模板PCR擴增,進行核酸拷貝數精確定量的分析方法。

將樣品處理分割成20000個單獨的PCR反應;這些反應之中的一部分含有靶標分子(陽性),而另外的則不含靶標分子(陰性)。在經過PCR擴增和信號分析后,根據陰性反應的比例對樣品中的靶標分子數目進行絕對計數,而不必參照標準品或內源性對照。

技術優勢
實驗流程

實驗全程通過密封芯片隔絕任何污染物,無需轉移步驟,避免樣品暴露

檢測內容

檢測基因

檢測位點

耐受藥物

敏感藥物

臨床意義

EGFR

T790M

第一代EGFR TKIs:吉非替尼、厄洛替尼、埃克替尼

第三代EGFR TKIs:Osimertinib(AZD9291)/ Rociletinib

基因變異信息指導EGFR TKIs用藥

QuantStudio® 3D Digital PCR System

固相封閉系統、檢測穩定、通量靈活、維護方便、性價比高優于同類型的三代PCR平臺,成為分子病理檢測的新選擇、

 

3D數字PCR

液滴數字PCR

ARMS-PCR

PCR反應原理

三代PCR反應,基于單分子模板PCR擴增

三代PCR反應,基于單分子模板PCR擴增

二代PCR反應,基于擴增阻滯突變系統的普通熒光PCR擴增

他液反應載體

固體芯片

乳化液滴

不對反應體系分割

液滴/體系穩定性

固相封閉系統穩定好

液滴穩定性差

/

結果分析

無需參照內源對照和標準品,直接給出目標分子拷貝數

無需參照內源對照和標準品,直接給了目標分子拷貝數

需內,外源對照,只能給出定性結果

靈敏度

0.01%

0.01%

1%

可檢測變異類型

SNV,indel,CNV,fusion

SNV,indel,CNV,fusion

SNV,indel,fusion

操作過程

操作主要集中在芯片上樣,其余全自動

油滴制備完成后,需要反板封膜等操作

更多手工操作,人為誤差對結果影響大

通量

通量靈活
1-24個test

適合高通量
8x(1-12)個test

通量靈活
1-94個test

儀器維護

定期樣準光程

定期校準光程,定期檢控乳滴了生器管道是否順暢

定期校準光程

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